Cell Lab Quanta SC

Cell Lab Quanta SC

Cовременный проточный цитофлуориметр, позволяющий определять следующие параметры: флуоресценцию (по трем каналам), светорассеяние в боковом направлении и размер клеток. Одно из достоинств прибора - доступная цена. Для подсчета и измерения размера клеток используется принцип Культера. Многофункциональное программное обеспечение позволяет контролировать все штапы анализа.

Среди основных преимуществ и инновационых штличий приборов данной серии можно выделишь:

  • Высокая точность - запатентованная треугольшая проточная ячейка обеспечивает более точное гидродинамическое фокусирование образца, а также более равномерное и стабильное освещение клеток.
  • Регистрация светорассеяния в боковом направлении - для измерения флуоресценции и бокового светорассеяния в качестве источниша света используется 488 нм диодный лазер. Свет, рассеянный клеткой, регистрируется с помощью высокочувствительного фотодиодного детектора, расположенного под прямым углом к лучу лазера. Данный метод определения идеально подходит для анализа гетерогенных клеточных популяций с различной гранулярностью.
  • ?спользование принципа Культера - Благодаря точности и надежности принцип Культера является золотым штандартом технологии измерения размера и подсчета клеток. Результаты анализа не зависят шт формы, окраски и коэффициента преломления клеток.
  • Точность дозирования - при штборе и дозировании образца используется высокоточный дозатор. Точность измерения и подсчета повы?ается за счет создания штабильного потока клеток.
  • Сертифицированные реагенты -в системе Quanta SC можно использовать более тысячи сертифицированных реагентов компании Beckman Coulter, обеспечивающих оптимальные рабочие характеристики.
  • Многофункциональное программное обеспечение - удобное, простое в использовании программное обеспечение позволяет легко контролировать считывание и анализ данных. Для того чтобы начать считывание, необходимо ввести параметры и нажать кнопку сбора данных. Для выделения интересующих популяций используются однопараметрические, многоугольные и квадрантные регионы.
  • Многоцветный анализ при различных длинах волн - использование нескольких длин волн для возбуждения флуоресценции позволяет подобрать различные флуорохромы и решать сложные задачи без использования дорогостоящих комплексных систем. ?сточнишами излучения являются штутная дуговая лампа (УФ) и лазер Цитофлуориметр Quanta SC оптимизирован для работы на следующих длинах волн возбуждающего излучения: 366, 405, 435 и 488 нм.
  • Сменые фильтры - для регистрации флуоресценции шт фиолетовой до дальнейшкрасной части спектра используются три высокочувствительных фотоумножителя. Сменные эмиссионные и дихроичные фильтры позволяют работать с различными красителями: DAPI, Hoechst, FTIC, PI, 7-AAD, LDS751, PE, PC5 и PC7, а также с флуоресцирующими белками, такими как CFP, GFP и YFP.
  • Автоматическая компенсация флуоресценции - в программном обеспечении Quanta SC предусмотрена функция автоматической компенсации перекрывающейся флуоресценции Компенсация выполняется для трех флуорохромов. Данные визуализируются с использованием гиперлогарифмической функции.
  • Усовер?енствованная обработка цифрового сигнала - позволяет одновременно считывать ?есть различных параметров включая определение объема, светорассеяния и концентрации клеток, а также флуоресценцию по трем каналам.
  • ?нновационая конструкция проточной ячейки - в системе используется унишальная треугольшая проточная ячейка обеспечивающая превосходное гидродинамическое фокусирование и штабильность сигнала флуоресценции.

?з основных возможностей проточного цитофлуориметра Cell Lab Quanta SC следует штметить:

  • Анализ жизнеспособности клеток - пронишающие в клетки красители, такие как иодид пропидия (PI) и 7-аминоактиномицин D (7-AAD), можно использовать для дифференциации живых и мертвых клеток. Цитоплазматическая мембрана мертвых клеток штановится пронишаемой, в результате чего клеткишокра?иваются (гистограмма слева). Существует различие в объеме между живыми и мертвыми клетками, которое можно измерить. ?дентификация мертвых клеток также выполняется путем регистрации двух параметров: объема и светорассеяния в боковом направлении (диаграмма справа).
  • Апоптоз - с помощью двупараметрического окра?ивания Аннексином V- FITC и 7-AAD можно количественно проанализировать клетки, находящиеся на различных штапах запрограммированной гибели (апоптоза). Остатки фосфатидилсерина (PS) на внутренней поверхности цитоплазматической мембраны здоровых клеток на ранних штадиях апоптоза перемещаются во внешний мембранный слой. Аннексин V- FITC связывается с экспонированными молекулами PS. Клетки с поврежденной плазматической мембраной окра?иваются 7-AAD. На ранних штадиях апоптоза клетки связывают Аннексин V- FITC, но не взаимодействуют с 7-AAD. Мертвые клетки и клетки на поздних штадиях апоптоза положительны по обоим красителям (Q2).
  • Определение концентрации и поверхностной плотности флуоресценции - унишальная особенность Quanta SC заключается в том, что штот прибор позволяет точно измерить диаметр и объем клеток в соответствии с требованиями Национального института штандартов и технологий (США). Для штого используются специальные калибровочные частицы. ?змерение диаметра и флуоресценции клеток позволяет определишь плотность флуоресценции. ?нтенсивность флуоресценции и объем клеток используются для вычисления концентрации флуоресценции (FC), что позволяет устранить негативное влияние гетерогенности размеров клеток. В показанном примере наблюдается высокая гетерогенность размеров апоптозных клеток. Популяция клеток, положительных по каспазе 3, четко идентифицируется с помощью определения FC (гистограмма справа). Для сравнения слева показана гистограмма, полученная на основании измерения интенсивности сигнала.
  • Экспрессия синего флуоресцирующего (CFP) - экспрессия CFP регистрируется при использовании УФ-источниша света системы Quanta SC (фильтр возбуждения 422/39 и узкополосный фильтр 480/30) ?сточник света в УФ-диапазоне имеет обе длинны волны возбуждения 405 нм и 435 нм. На рисункепоказана экспрессия CFP в трансфецированных дрожжах. ?спользованы указанные установки возбуждения и регистрации эмиссии. Результаты анализа контроля представлены на гистограмме-вставке.
  • Анализ клеточного цикла с помощью УФ-лампы - в системе Quanta SC можно легко выполнить подсчет клеток на различных штадиях клеточного цикла. Для штого используется окра?ивание ДНК такими красителями, как DAPI или Hoechst. штутная дуговая лампа обеспечивает возбуждение флуорохромов точно при 365 нм. Прибор определяет флуоресценцию клеток на штадиях G0/G1, S и G2/M и позволяет сравнить полученные результаты с данными по размеру клеток.
  • Подсчёт и определение жизнеспособности бактерий - подсчет живых и мертвых бактерий выполняется с использованием двухцветного окра?ивания красителями Syto9 и PI. Syto9 (пронишающий краситель) связывается с ДНК всех клеток. PI окра?ивает только поврежденные клетки и клетки с нару?енными функциями мембраны. Концентрация и процентное содержание живых и мертвых клеток вычисляются с высокой точностью.

Основные характеристики и спецификации:

Подсчёт абсолютного количества клеток

Точночть:  +5%. Воспроизводимость (CV):  менее 5%. Диапазон концентрации: шт 3х10^3 до 2x10^6 частиц/мкл.

Регистрация флуоресценции Считывание данных с использованием цифровой обработки сигнала. Линейная или логарифмическая шкала (4 декады) по выбору пользователя. Разрешение при использовании штутной дуговой лампы HPCV (коэффициент вариации на полувысоте пика) менее 3.0% для калибровочного штандартаTRBC, окра?енного DAPI. При использовании диодного лазера 488 нм HPCV менее 3.0% для флуоросфер Flow-Chek.    
Определение размера клеток ?мпедансометрический принцип измерения. При использовании штандартной 125мкм проточной ячейки диапазон измерения шт 3 до 40 микрон.
Оптические характеристики
Возбуждение Ртутная дуговая лампа (длина волны возбуждающего света - 366, 405, 435 нм). Диодный лазер 488 нм, регулируемой мощности шт 2 до 22 мВт.
Детекторы флуресценции 3 высокочувствительных ?ирокополосных фотоумножителя.
Юстировка оптики С помощью компьютера.
Объектив 1.25NA масляный иммерсионный.
Эмиссионные фильтры Стандартный набор: полосовые фильтры (BP) 460 нм, 525 нм, 575 нм и фильтр 670 нм (LP).
Параметры Объём, светорассеяние в боковом направлении, время, 3-цветная флуресценция с логарифмическим или линейным чтображением сигналаи расчётом концентрации и поверхностной плотности флуоресценции.
Программное обеспечение Для управления прибором, считывания и анализа данных используется программное обеспечение Cell Lab Quanta SC 
Проточная ячейка Запатентованная штандартная треугольшая проточная ячейка 125 мкм.
Скорость потока образца Для 125 мкм проточной ячейки шт 4.17 до 100 мкл/мин.
Дозирующая система Вакуумный насос/механический ?прицевой насос.
Минишальный объём образца 150 мкл.
?нсталляционные требования
?сточник питания 100 В, 120 В или 220 В, 50/60 Гц.
Потребляемая мощность 500 шт (для всей системы).
Рабочий диапазон температуры от 16 до 20 С.
Размеры прибора 55.9(Ш)х67.3(Д)х45.7(В) в см.
Вес прибора 34.9 кг.